Instituto Nacional de Ciência e Tecnologia de Estratégias de Interação Patógeno-Hospedeiro (IPH)
Descrição: A proposta de criação do Instituto Nacional de Ciência e Tecnologia de Estratégias de Interação Patógeno-Hospedeiro (IPH) tem por objetivo integrar pesquisadores com experiência em investigação de mecanismos moleculares relacionados à interação patógeno-hospedeiro em um projeto multidisciplinar, em forma de Rede. Assim, a presente proposta tem como objetivo promover a interação de pesquisadores com diferentes expertises para investigar e desenvolver novos conceitos e ferramentas relacionados à interação patógeno-hospedeiro, formar pessoal qualificado e promover avanços no controle das doenças por eles causadas em humanos (infecções fungícas e protozooses) e divulgar resultados para a comunidade científica e leiga. Outra prioridade é desenvolver pesquisa e pós-graduação qualificadas com tecnologias avançadas em novos centros não consolidados das regiões Centro-Oeste e Norte do país. O IPH será constituído por 14 Instituições Científicas e Tecnológicas (ICTs) sendo 13 públicas, correspondendo a 21 laboratórios de pesquisa associados. Compreende também uma instituição de ensino e pesquisa privada e uma empresa de base tecnológica..
Situação: Em andamento; Natureza: Pesquisa.
Alunos envolvidos: Graduação: (20) / Mestrado acadêmico: (45) / Doutorado: (54) .
Integrantes: Célia Maria de Almeida Soares - Coordenador / MARISTELA PEREIRA - Integrante / Wesley de Almeida Brito - Integrante / Alexandre Melo Bailão - Integrante / Rosely Maria Zancopé Oliveira - Integrante / Valéria Dutra - Integrante / Rodrigo Almeida Paes - Integrante / Carlos Andre Ricart - Integrante / Marjoire M Marini - Integrante / Simone Schneider Weber - Integrante / Sébastien O. Charneau - Integrante / Laurime Lacerda Pigosso - Integrante / PIZZINI, CLÁUDIA VERA - Integrante / Cecilia Maria Alves de Oliveira - Integrante / Lucilia Kato - Integrante / Roosevelt Alves da Silva - Integrante / Juliana Alves Parente-Rocha - Integrante / MCEWEN, JUAN G. - Integrante / Mariana Vieira Tomazett - Integrante / Clayton Luiz Borges - Integrante / Lilian Cristiane Baeza - Integrante / PARENTE, ANA FLÁVIA ALVES - Integrante / Jaime Martins de Santana - Integrante / André Corrêa Amaral - Integrante / André Luis Sousa dos Santos* - Integrante / Antonio Rossi Filho - Integrante / Claudia Masini d?Avila Levy* - Integrante / Gabriela R M Duarte - Integrante / Izabela M. Dourado Bastos - Integrante / José Franco da Silveira - Integrante / Marta Helena Branquinha - Integrante / Milton Adriano Pelli de Oliveira* - Integrante / Mirelle Garcia Silva - Integrante / Nilce Maria Martinez Rossi* - Integrante / Rodrigo Pedro Pinto - Integrante.
Financiador(es): Fundação de Amparo a Pesquisa do Estado de Goiás - Auxílio
financeiro.
Metabolic Adaptation and nutrient acquisition of Paracoccidioides spp. during host interactions: Search for targets and new therapeutic approaches
Descrição: Paracoccidioides, um complexo de quatro espécies filogenéticas é o agente causal da paracoccidioidomicose, uma micose sistêmica, geralmente de caráter crônico. Mecanismos moleculares envolvidos na adaptação metabólica de Paracoccidioides tem sido investigados e são de grande interesse, dado a relevância dessa resposta ao fenótipo de virulência em vários fungos patogênicos. Estudos transcricionais e proteômicos indicam que o fungo utiliza rotas metabólicas preferenciais na dependência do morfotipo e da inclusão em diferentes grupos filogenéticos, assim como em condições de interação com o hospedeiro. Para investigar vias diferencialmente expressas nos morfotipos de Paracoccidioides, assim como em diferentes membros do complexo estão sendo propostas neste projeto análises bioquímicas, genéticas e proteômicas. Nossos objetivos são: (i) caracterizar enzimas de vias diferencialmente expressas (piruvato desidrogenase e piruvato descarboxilase- fermentação alcoólica) pelos morfotipos do patógeno; (ii) caracterizar enzimas de vias diferencialmente expressas por membros do complexo Paracoccidioides (piruvato desidrogenase); (iii); obter transformantes para os genes codificantes das enzimas citadas e caracteriza-los fenotipicamente; (iv) caracterizar a função dos genes codificantes das enzimas citadas por complementação gênica em sistema heterólogo; (v) realizar análises de expressão gênica por luminescência; (vi) realizar síntese química de potenciais antifúngicos e realizar rastreamento para a enzima metilcitrato sintase a qual é ausente em humanos.
O projeto é desenvolvido em associação com Mathias Brock, University of Nottinghan no edital Brazil-UK Neglected Infectious Diseases Partnership Initiative- MRC-CONFAP.
Situação: Em andamento; Natureza: Pesquisa.
Alunos envolvidos: Graduação: (5) / Mestrado acadêmico: (6) / Doutorado: (8) .
Integrantes: Célia Maria de Almeida Soares - Coordenador / MARISTELA PEREIRA - Integrante / Alexandre Melo Bailão - Integrante / Clatyon Luiz Borges - Integrante / Juliana Alves Parente-Rocha - Integrante / Mathias Brock - Integrante.
Moléculas envolvidas na interação patógeno-hospedeiro em doenças negligenciadas de interesse nacional e da região Centro-Oeste
Descrição: A superfície de micro-organismos patogênicos atua como uma barreira inicial no contato entre o parasito e o hospedeiro. Além de funcionar como uma barreira mecânica, ela abriga um arsenal de macromoléculas imunogênicas e, dessa forma, é um potencial alvo na busca de candidatos a vacinas. A capacidade do patógeno de interagir com as estruturas da superfície do hospedeiro é essencial ainda para a colonização, invasão e crescimento desse patógeno.
Mudanças no ambiente geram uma variedade de sinais detectáveis, os quais os organismos percebem e podem promover mudanças morfogenéticas como uma forma de adaptação ao ambiente. Para muitos organismos, a habilidade em sofrer mudanças morfológicas é um fator crucial de virulência. Dada a importância das modificações pós-traducionais nas respostas a estímulos externos, juntamente com o interesse no conhecimento dos mecanismos que permitem aos patógenos responder aos estímulos gerados pela permanência no organismo hospedeiro, o estudo comparativo do fosfoproteoma de Paraccoccidioides spp., T. cruzi e Plasmodium spp. em diferentes estágios da transição morfogenética poderá elucidar respostas relevantes sobre o mecanismo que dispara a diferenciação e poderá ser utilizado para o desenvolvimento de novas drogas terapêuticas.
A transição de Paracoccidioides da fase saprobiótica para a forma patogênica é um evento de grande interesse no estudo da virulência e patogenicidade, uma vez que, está intimamente relacionado com a adaptação do fungo ao ambiente do hospedeiro e consequentemente ao estabelecimento da infecção. Por esse motivo, tem havido uma concentração de esforços no sentido de entender melhor esse evento e as alterações metabólicas do fungo durante esse processo.
O processo de invasão é o primeiro passo da interação parasito-hospedeiro. Para completar seu ciclo de vida, o T. cruzi tem a obrigação de invadir a matriz extracelular e células hospedeiras para se diferenciar na forma replicativa amastigota. Isso implica em que o parasito utilize vários fatores de excreção/secreção (o exoproteoma) e de ligantes as membranas do hospedeiro para ter sucesso na infecção e na virulência.
Proteínas secretadas desempenham papéis em diferentes processos biológicos incluindo patogênese e defesa. O presente projeto propõe a análise proteômica da interação do T. cruzi com uma célula hospedeira de modo a tentar contribuir para um aumento do conhecimento dos mecanismos de interação patógeno-hospedeiro, considerando a possibilidade de analisar as proteínas tanto do parasito quanto das células hospedeiras na hora da invasão. Desta forma poderemos ter uma visão geral da interação parasito-hospedeiro na infecção e dos processos moleculares apresentados concomitantemente por e em cada um dos organismos.
Durante o ciclo de vida, Plasmodium spp sofre uma série de modificações morfológicas e metabólicas, com algumas etapas de diferenciações celulares complexas. Sendo a morfogênese dos merozoítos e a exflagelação dos microgametas de Plasmodium spp. fases cruciais para a propagação dos parasitos, as moléculas envolvidas poderão constituir alvos favoráveis ao desenvolvimento de estratégias terapêuticas alternativas às existentes.
A utilização da fosfoproteômica virá complementar as estratégias e metodologias já utilizadas com o intuito de se compreender os eventos que sinalizam e governam a mudança morfológica dos organismos Paracoccidioides, T. cruzi e Plasmodium, gerando assim informações que deverão contribuir para o conhecimento das adaptações utilizadas pelos patógenos no hospedeiro. Adicionalmente, os estudos deverão permitir a identificação de fatores de virulência dos patógenos e, consequentemente a identificação de potenciais moléculas alvos de drogas.
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Situação: Em andamento; Natureza: Pesquisa.
Integrantes: Célia Maria de Almeida Soares - Coordenador / Clatyon Luiz Borges - Integrante / Juliana Alves Parente - Integrante / Patrícia de Souza Lima - Integrante / Jaime Martins Santana - Integrante / Carlos Andre Ricart - Integrante / Bailao, Alexandre M - Integrante / Laurine Lacerda Pigosso - Integrante / Elisa Flávia Bailão Cardoso - Integrante.
Componentes de superfície em Paracoccidioides: identificação e caracterização de fatores de interação com o hospedeiro
Descrição: A análise global das respostas moleculares de um patógeno ao seu hospedeiro representa um grande desafio. Análises proteômicas crescentes estão sendo utilizadas como uma estratégia de investigar a interação de patógenos com seus hospedeiros. Para alguns patógenos como Paracoccidioides os estudos são facilitados pela disponibilidade de dados transcricionais e pela descrição de genomas estruturais. O estudo da interação patógeno-hospedeiro revela fatores de virulência que podem vir a serem alvos específicos para o desenvolvimento de biofármacos visando ao tratamento de doenças. O ponto central desse projeto é ampliar os estudos existentes sobre moléculas do patógeno Paracoccidioides, prováveis alvos de interação dos patógeno ao hospedeiro. Perfis proteômicos fornecem a oportunidade para compreensão da interação patógeno hospedeiro e tem trazido importantes contribuições aos mecanismos de patogênese em vários sistemas biológicos. Nossa proposta é descrever os secretomas e proteínas de membrana de membros do complexo Paracoccidioides visando à identificação de potenciais fatores de virulência no patógeno. Ensaios de ligação de proteínas secretadas a macrófagos deverão selecionar moléculas para investigações de função. O projeto objetiva ampliar os conhecimentos já descritos pelo grupo utilizando modelos que simulam as condições do hospedeiro. Ainda nesse contexto, pretende-se a caracterização de novas moléculas, as quais podem ser alvos interessantes para a modificação das interações patógeno-hospedeiro através da inibição/bloqueio de fatores de virulência, impedimento da colonização do hospedeiro e do progresso do processo infeccioso..
Situação: Em andamento; Natureza: Pesquisa.
Alunos envolvidos: Graduação: (2) / Mestrado acadêmico: (3) / Doutorado: (2) .
Integrantes: Célia Maria de Almeida Soares - Coordenador / Alexandre Melo Bailão - Integrante / Clayton Luiz Borges - Integrante / Juliana Alves Parente - Integrante / Patrícia de Souza Lima - Integrante / Mirelle Garcia Silva - Integrante / Lilian Cristiane Baeza - Integrante / Laurime Lacerda Pigosso - Integrante / Ana Flavia Alves Parente - Integrante.
Financiador(es): Fundação de Amparo a Pesquisa do Estado de Goiás - Auxílio
financeiro.
Investigação das estratégias utilizadas por Paracoccidioides brasiliensis para aquisição de ferro: produção de sideróforos, captação e fontes preferenciais de ferro.
Descrição: Paracoccidioides spp.,um complexo de quatro espécies filogenéticas, e aqui referido como Paracoccidioides brasiliensis é o agente causal da paracoccidioidomicose, uma micose sistêmica, geralmente de caráter crônico. A resposta de P. brasiliensis a estresses ambientais é de grande interesse, dado a relevância dessa resposta a mecanismos de virulência em vários fungos patogênicos. Fatores estressantes como a privação de ferro são aspectos proeminentes da resposta imune do hospedeiro e baixos níveis desses compostos são associados à expressão de fatores de virulência em microrganismos. Estudos transcricionais realizados em nosso laboratório em condições de interação P. brasiliensis-hospedeiro sugerem fortemente um grande requerimento de ferro no processo infeccioso. Para investigar o metabolismo e homeostase de ferro em P. brasiliensis estão sendo propostas análises bioquímicas, genômicas e proteômicas. Nossos objetivos são: (i) caracterizar a resposta adaptativa global de P. brasiliensis a condições de deficiência de ferro através de análises transcricionais; (ii) caracterizar a via não redutiva de captação de ferro, através da produção e secreção de sideróforos; (iii) caracterizar as fontes preferenciais de ferro e as moléculas do fungo envolvidas na captação das fontes; (iv) caracterizar a via redutiva de captação de ferro em P.brasiliensis; (v) obter transformantes para genes das vias citadas..
Situação: Em andamento; Natureza: Pesquisa.
Alunos envolvidos: Graduação: (4) / Mestrado acadêmico: (2) / Doutorado: (6) .
Integrantes: Célia Maria de Almeida Soares - Coordenador / Silvia Maria Salem Izacc - Integrante / Alexandre Melo Bailão - Integrante / Maria José Soares Mendes Giannini - Integrante / Clayton Luiz Borges - Integrante / Juliana Alves Parente - Integrante / Wellington Santos Martins - Integrante / Juan G McEwen - Integrante / Alan George Smulian - Integrante / George S. Deepe Jr - Integrante / Michael S. Winters - Integrante / Tristan Brandhorst - Integrante / Ana Flavia Alves Parente - Integrante / Orville Hernandez - Integrante / Gregory M. Gauthier - Integrante.
Financiador(es): Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico - Auxílio
financeiro.
Bioprospecção de determinantes de virulência e alvos para novas terapias em patógenos humanos revelados por análises proteômicas.
Descrição: A análise global das respostas moleculares de um patógeno ao seu hospedeiro representa um grande desafio. Análises proteômicas crescentes estão sendo utilizadas como uma estratégia de investigar a interação de patógenos com seus hospedeiros. Para alguns patógenos como Paracoccidioides brasiliensis, Trypanosoma cruzi e Leishmania braziliensis esses estudos são facilitados pela disponibilidade de dados transcricionais e pela descrição de genomas estruturais. O estudo da interação patógeno-hospedeiro revela fatores de virulência que podem vir a serem alvos específicos para o desenvolvimento de biofármacos visando ao tratamento de doenças. O ponto central desse projeto é ampliar os estudos existentes nos grupos consorciados sobre vias metabólicas centrais e moléculas de P. brasiliensis, T. cruzi e L. braziliensis, prováveis alvos dos patógenos ao hospedeiro. Perfis proteômicos fornecem a oportunidade para compreensão da interação patógeno hospedeiro e tem trazido importantes contribuições aos mecanismos de patogênese em vários sistemas biológicos. Para a bioprospecção de novos fatores de virulência e alvos para novas terapias nos patógenos acima citados serão analisados proteomas da superfície de células dos microrganismos, assim como os respectivos secretomas. Adicionalmente serão empregados modelos ex vivo visando à construção de mapas protéicos comparativos especificamente no que concerne ao patógeno humano P. brasiliensis. O projeto objetiva ampliar os conhecimentos já descritos pelos grupos consorciados utilizando modelos que simulem as condições do hospedeiro. Ainda nesse contexto o estudo da privação de zinco, processo ainda não descrito para os patógenos em estudo, permitirá a identificação e caracterização de novas moléculas comuns e ou específicas aos sistemas, as quais podem ser alvos interessantes para a modificação das interações patógeno-hospedeiro através da inibição/bloqueio de fatores de virulência, impedimento da colonização ..
Situação: Em andamento; Natureza: Pesquisa.
Alunos envolvidos: Graduação: (3) / Mestrado acadêmico: (4) / Doutorado: (12) .
Integrantes: Célia Maria de Almeida Soares - Coordenador / MARISTELA PEREIRA - Integrante / Silvia Maria Salem Izacc - Integrante / Alexandre Melo Bailào - Integrante / Clayton Luiz Borges - Integrante / Sonia Nair Bao - Integrante / Juliana Alves Parente - Integrante / Wellington Santos Martins - Integrante / Jaime Martins Santana - Integrante / Carlos Andre Ricart - Integrante / Souza MV - Integrante / Roosevelt Alves da Silva - Integrante / Sébastien O. Charneau - Integrante.
Microarranjos de DNA e proteoma no estudo de interações patógeno-hospedeiro em doenças humanas: modelos in vivo e ex vivo de infecção
Situação: Em andamento; Natureza: Pesquisa.
Alunos envolvidos: Mestrado acadêmico: (5) Doutorado: (8) .
Integrantes: Célia Maria de Almeida Soares - Coordenador.
Respostas transcricionais e traducionais de Paracoccidioides brasiliensis aos estresses oxidativo e por óxido nítrico: Implicações para a patogênese do fungo
Descrição: O ponto central deste projeto é ampliar estudos existentes em nosso laboratório sobre vias metabólicas centrais e moléculas de Paracoccidioides brasiliensis prováveis alvos da resposta do fungo a estresses por espécies reativas de oxigênio e nitrogênio. Perfis transcricionais e proteômicos fornecem oportunidade para decifrar-se a interação patógeno-hospedeiro a nível global e tem trazido importantes contribuições ao conhecimento de mecanismos de patogênese, em vários sistemas biológicos. O nosso laboratório tem investigado a expressão diferencial de genes em P. brasiliensis em condições que simulam a infecção no hospedeiro humano, bem como em modelos animais de infecção. Estudos prévios em nosso laboratório evidenciaram o papel das catalases A, C e P em resposta a diferentes tipos de estresse. Foi observado que a Catalase P apresentou alta expressão em células leveduriformes, sendo provavelmente envolvida no controle de espécies reativas de oxigênio. O fungo P. brasiliensis apresenta resposta oxidativa em resposta à fagocitose por macrófagos induzindo a expressão de transcritos codificantes das catalases A e P. Visando estender os resultados iniciais, bem como a contribuição de nosso grupo ao conhecimento das interações fungo-hospedeiro pretendemos no presente projeto atender aos seguintes objetivos:
1- Caracterizar o perfil transcricional da forma parasitária do fungo P. brasiliensis em resposta ao estresse por espécies reativas de nitrogênio e oxigênio, mimetizando as condições no hospedeiro.
2- Analisar, através de macroarranjos de DNA, a expressão de genes relacionados a estresse ambiental em diferentes condições in vivo e ex vivo.
3- Caracterizar o perfil proteômico da forma parasitária do fungo P. brasiliensis em resposta a estresse por espécies reativas de nitrogênio e oxigênio, mimetizando as condições no hospedeiro.
4- Obter o perfil proteômico de células leveduriformes de P. brasiliensis durante infecção por macrófagos.
5-Correlacionar os dados tran.
Situação: Em andamento; Natureza: Pesquisa.
Alunos envolvidos: Graduação: (1) / Mestrado acadêmico: (2) / Doutorado: (3) .
Integrantes: Célia Maria de Almeida Soares - Coordenador / MARISTELA PEREIRA - Integrante / GEORGE S DEEPE JR - Integrante / Silvia Maria Salem Izacc - Integrante / Clayton Luiz Borges - Integrante / Alexandre Melo Bailão - Integrante / Augusto Schrank - Integrante / Wellingotn Santos Martins - Integrante / Juliana Alves Parente - Integrante / Carlos Pelleschi Taborda - Integrante / Alan George Smulian - Integrante / Michael S. Winters - Integrante / Luciane Almeida - Integrante.
Financiador(es): Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico - Auxílio
financeiro.
Transcriptoma e proteoma do processo infeccioso por Paracoccidioides brasiliensis e Cryptococcus gattii: Modelos in vitro, in vivo e ex vivo, um estudo comparativo
Descrição: A análise global das respostas moleculares de um patógeno ao seu hospedeiro mamífero representa um grande desafio. O ponto central deste projeto é ampliar os estudos existentes nos grupos consorciados sobre vias metabólicas centrais e moléculas de Paracoccidioides brasiliensis e Cryptococcus gattii prováveis alvos da resposta do fungo ao hospedeiro. Perfis transcricionais e proteômicos fornecem oportunidade para compreender a interação patógeno-hospedeiro em nível global e têm trazido importantes contribuições ao conhecimento de mecanismos de patogênese, em vários sistemas biológicos. Os grupos envolvidos na proposta têm investigado a expressão diferencial de genes nos dois sistemas propostos em condições que simulam a infecção no hospedeiro humano, bem como em modelos animais de infecção. Análises transcricionais globais são ainda incipientes em patógenos humanos e inexistentes em P. brasiliensis e C. gattii no que concerne a modelos in vivo de infecção. Dessa maneira será realizado o transcriptoma dos dois patógenos em modelo pulmonar de infecção utilizando o sequenciamento de alta performance (pirosequenciamento de cDNAs, 454 Roche). Para identificar proteínas presumivelmente associadas à interação com o hospedeiro, será analisado o proteoma diferencial de células fúngicas recuperadas de macrófagos, assim como derivadas de tratamentos de hipóxia e de privação nutricional. Os fungos cultivados in vitro em condições padrão serão comparados aos modelos in vivo e ex vivo. A análise proteômica diferencial será realizada por eletroforese bidimensional seguida de identificação por espectrometria de massas (Q-Tof MS/MS). O projeto objetiva ampliar os conhecimentos já descritos pelos grupos consorciados, agora utilizando abordagens de alta performance e utilizando modelos animais e de células em cultura. Visamos descrever os processos metabólicos que prevalecem durante o processo infeccioso por P. brasiliensis e C. gattii, assim como correlacionar os dados dos padrões de.
Situação: Em andamento; Natureza: Pesquisa.
Alunos envolvidos: Graduação: (4) / Mestrado acadêmico: (5) / Doutorado: (7) .
Integrantes: Célia Maria de Almeida Soares - Coordenador / MARISTELA PEREIRA - Integrante / MARISTELA BRITO - Integrante / Wesley de Almeida Brito - Integrante / Alexandre Melo Bailão - Integrante / Marilene Henning Vainstein - Integrante / Augusto Schrank - Integrante / Ana Tereza Ribeiro Vasconcelos - Integrante / Marisa Fabiana Nicolás - Integrante / Clayton Luiz Borges - Integrante / Juliana Alves Parente - Integrante / Marcio Lourenço Rodrigues - Integrante / Carlos Pelleschi Taborda - Integrante / Alan George Smulian - Integrante / George S. Deepe Jr - Integrante / Michael S. Winters - Integrante / Luciane Almeida - Integrante / Charley Staats - Integrante / Lucélia Santi - Integrante / Mauricio Egidio Cantão - Integrante / Fernando Gomes Barcellos - Integrante / Leonardo Nimrichter - Integrante.
Financiador(es): Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico - Auxílio
financeiro.
Estratégias genômicas e proteômicas no estudo da expressão de fatores de virulência em Paracoccidioides brasiliensis e Cryptococcus neoformans
Descrição: Esse projeto aprovado em edital MCT/FINEP/Ação Transversal-Rede GENOPROT 07/2007 propõe uma análise global de transcritos e proteínas , potenciais fatores de virulência, nos patógenos humanos Paracoccidioides brasiliensis e Cryptococcus neoformans/gattii. O foco central do projeto é ampliar os estudos dos laboratórios da rede (UFG, UFRGS, UNESP e IPEC) sobre moléculas desses fungos, que representam possíveis alvos na interação fungo-hospedeiro. Nesse contexto, as novas moléculas a serem identificadas, se somarão ao arsenal de alvos importantes no controle da infecção, através da inibição ou bloqueio de possíveis fatores de virulência, o que pode impedir a colonização e o progresso ou o estabelecimento do processo infeccioso. Nossa proposta é utilizar ferramentas de genômica e proteômica, que são objeto das abordagens de todos os grupos envolvidos na proposta, com o objetivo de identificar moléculas expressas em condições de privação de micro nutrientes a que se expõe o patógeno durante a infecção. Estudando os dois sistemas fúngicos propomos descrever moléculas comuns e aquelas específicas nos dois sistemas que podem estar relacionadas a características biológicas dos fungos em estudo. Da mesma forma será analisada a expressão de adesinas na condição de privação de micro nutrientes, simulando as condições do hospedeiro..
Situação: Em andamento; Natureza: Pesquisa.
Alunos envolvidos: Graduação: (3) / Mestrado acadêmico: (4) / Doutorado: (4) .
Integrantes: Célia Maria de Almeida Soares - Coordenador / MARISTELA PEREIRA - Integrante / GEORGE S DEEPE JR - Integrante / Silvia Maria Salem Izacc - Integrante / Rosely Maria Zancopé Oliveira - Integrante / Marilene Henning Vainstein - Integrante / Augusto Schrank - Integrante / Maria Jose Mendes Giannini - Integrante / Christiane Pienna Soares - Integrante / Joshua Nosanchuk - Integrante / Katia Flavia Fernandes - Integrante / Alexsandro Santos Soares - Integrante / Célia Regina Ribeiro Carlini - Integrante / Ivan Torres Nicolau de Campos - Integrante / Marcio Antonio Duarte - Integrante / Selma Terezinha Milagre - Integrante / Alan George Smulian - Integrante.
Financiador(es): Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico - Bolsa / Universidade Estadual Paulista Júlio de Mesquita Filho - Cooperação / Universidade Federal do Rio Grande do Sul - Cooperação / Fundação Oswaldo Cruz - Cooperação / Financiadora de Estudos e Projetos - Auxílio
financeiro.Número de orientações: 2
Título: Regulação nicho-específica de processos metabólicos no patógeno Paracoccidioides brasiliensis
Descrição: O ponto central deste projeto é ampliar estudos existentes em nosso laboratório sobre vias metabólicas centrais e moléculas de Paracoccidioides brasiliensis prováveis alvos de interação do fungo com o hospedeiro, considerando-se diferentes sítios de infecção. A aplicação de estratégias de transcriptoma e proteoma para o estudo de interações patógeno-hospedeiro tem trazido importantes contribuições ao conhecimento de mecanismos de patogênese, em vários sistemas biológicos. O nosso laboratório tem investigado a expressão diferencial de genes em P. brasiliensis em condições que simulam a infecção no hospedeiro humano, bem como em modelos animais de infecção. Em um estudo prévio identificamos através da estratégia de análise de diferença representacional (cDNA- RDA) genes super expressos pelo fungo durante o processo de infecção no fígado de animais experimentais. Nesse trabalho inicial verificamos que durante o processo infeccioso no fígado de camundongos, P. brasilienses exacerba principalmente a expressão de genes relacionados ao sistema de transporte de micro nutrientes essenciais, como ferro e cobre e à adaptação e sobrevivência ao meio do hospedeiro. Os primeiros estudos foram ampliados com a construção de uma biblioteca de cDNA de células leveduriformes do fungo recuperadas de fígado de camundongos infectados. Foram gerados 4934 ESTs (expressed sequence tags), as quais foram comparadas com as ESTs disponíveis em bancos públicos de dados e com os dados gerados no Projeto Genoma Centro-Oeste de P. brasiliensis, isolado Pb01. Foi possível a descrição de novos genes (35% do total de ESTs), bem como a descrição de genes super regulados, em comparação aos dados obtidos in vitro (Projeto Genoma Centro-Oeste). Nesse contexto foi possível a definição de vias metabólicas centrais ativadas durante a infecção em fígado. De forma semelhante foi possível, também através de análises de transcriptomas, sugerir vias metabólicas preferencialmente ativadas em P. brasiliensis dur.
Situação: Em andamento; Natureza: Pesquisa.
Alunos envolvidos: Graduação: (2) / Mestrado acadêmico: (1) / Doutorado: (5) .
Integrantes: Célia Maria de Almeida Soares - Coordenador / MARISTELA PEREIRA - Integrante / GEORGE S DEEPE JR - Integrante / Monica Santiago Barbosa - Integrante / Wellingotn Santos Martins - Integrante / Maria Jose Mendes Giannini - Integrante / George S. Smullian - Integrante / Jaime Martins Santana - Integrante.
Financiador(es): Pontifícia Universidade Católica de Goiás - Cooperação / Universidade de Brasília - Cooperação / University of Cincinnati - Cooperação / Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico - Auxílio
financeiro / Universidade Estadual Paulista Júlio de Mesquita Filho - Cooperação.
Estratégias proteômicas para o estudo da parede celular e membrana de Paracoccidioides brasiliensis
Descrição: O ponto central desse projeto é ampliar estudos existentes em nosso laboratório sobre moléculas de Paracoccidioides brasiliensis, prováveis alvos de interação fungo-hospedeiro. O nosso foco é estudar o proteoma da parede/membrana celulares do fungo por solubilização diferencial de moléculas, espectrometria de massa, determinação da atividade enzimática de moléculas de superfície, localização celular de moléculas de interesse, estudo de interações proteína-proteína identiifcando e caracterizando proteínas que possam ser relevantes para a interação do patógeno com o hospedeiro. A nossa expectativa é que os estudos forneçam evidencias para a presença de enzimas modificadoras de polissacarídeos, adesinas, proteínas de defesa, transportadores de íons e outras proteínas na superfície de células leveduriformes do fungo..
Situação: Em andamento; Natureza: Pesquisa.
Alunos envolvidos: Graduação: (4) / Mestrado acadêmico: (4) / Doutorado: (7) .
Integrantes: Célia Maria de Almeida Soares - Coordenador / MARCELO VALLE SOUZA - Integrante / MARISTELA PEREIRA - Integrante / CIRANO JOSÉ ULHOA - Integrante / Silvia Maria Salem Izacc - Integrante / Sonia Nair Bao - Integrante / Jaime Martins Santana - Integrante / Katia Flavia Fernandes - Integrante / Carlos Andre Ricart - Integrante.
Financiador(es): Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico - Bolsa / Universidade de Brasília - Cooperação / Financiadora de Estudos e Projetos - Auxílio
financeiro.Número de orientações: 3
Genes e proteinas relacionados ao processo infectivo de Paracoccidioides brasiliensi- Estudo da cinética da expressão de genes através de captura seletiva de sequencias transcritas (SCOTS) e análise de interações protéicas de Paracoccidioides brasil
Descrição: O ponto central deste projeto é ampliar estudos existentes em nosso laboratório sobre moléculas de Paracoccidioides brasiliensis prováveis alvos de interação do fungo com o hospedeiro humano. Neste contexto, várias moléculas de P. brasiliensis, caracterizadas em nosso laboratório, se constituem em alvos interessantes para a modificação das interações fungo-hospedeiro, através da inibição ou bloqueio de possíveis fatores de virulência, o que pode levar ao impedimento da colonização no hospedeiro e ao progresso do processo infectivo.
A aplicação de transcritptoma para estudar interações patógeno-hospedeiro tem trazido importantes contribuições ao mecanismo de patogênese, em vários sistemas biológicos. Em um estudo prévio identificamos através de hibridização subtrativa de cDNAs e posterior seqüênciamento, vários genes que podem contribuir para a adaptação e sobrevivência de P. brasiliensis ao meio do hospedeiro durante o processo infectivo. Nesse contexto foram identificados, como altamente expressos, genes codificantes para transportadores de ferro (zrt1), transportadores de cobre (ctr3), proteínas de estresse (particularmente a HSP 30, ClpA, HSp70, HSP90), gliceraldeído 3-fosfato desidrogenase (gapdh), glutamina sintetase (gln1), osmosensores (sho1), tirosinase, entre outros, os quais devem ser relevantes para a adaptação do fungo ao hospedeiro humano.
Em um contexto pós genômico, pretendemos estudar o interactoma das moléculas identificadas para o melhor entendimento da dinâmica de interação dessas proteínas durante o processo infectivo pelo fungo. Nós pretendemos construir uma biblioteca de duplo híbrido utilizando RNA da forma leveduriforme de P. brasiliensis, para identificar possíveis interações. A partir desses estudos iniciais, pretendemos mapear a interação dos transportadores de ferro e cobre, da GAPDH, da HSP30, entre outras moléculas, durante o processo infectivo para o melhor entendimento da dinâmica desses processos relacionados à patogenicidad.
Situação: Em andamento; Natureza: Pesquisa.
Alunos envolvidos: Graduação: (4) / Mestrado acadêmico: (2) / Doutorado: (5) .
Integrantes: Célia Maria de Almeida Soares - Coordenador / MARIA SUELI SOARES FELIPE - Integrante / MARISTELA PEREIRA - Integrante / GEORGE S DEEPE JR - Integrante / Silvia Maria Salem Izacc - Integrante / Clayton Luiz Borges - Integrante / Alexandre Melo Bailão - Integrante / Zilma Alves Maia - Integrante / Sonia N Bao - Integrante / Monica Santiago Barbosa - Integrante / Sabrina Fonseca Ingenito Moreira - Integrante / Wellington Santos Martins - Integrante / George S. Smullian - Integrante / Jaime Martins Santana - Integrante / Alfredo Miranda de Góes - Integrante / Tércio de Souza Góes - Integrante.
Paracoccidioides brasiliensis: Abordangens enfocando perfis de expressão gênica e moléculas recombinantes no estudo de interações patógeno-hospedeiro: Aplicações biotecnológicas
Descrição: O fungo dimórfico Paracoccidioides brasiliensis, agente etiológico da paracoccidioidomicose apresenta importância médica crescente. A doença é endêmica nas Américas Central e do Sul, com a maioria das ocorrências no Brasil, o qual apresenta 80% dos casos descritos. P. brasiliensis parece ter múltiplos mecanismos de interação com o seu hospedeiro, o que deve incluir a presença de moléculas de superfície, as quais atuariam como fatores de adesão, enzimas proteolíticas e antígenos. Com o objetivo de estudar a resposta de P.brasiliensis ao contacto com células do hospedeiro serão analisados os perfis de transcriçao do fungo isolado de infecção experimental em camundongos, fungo exposto a sangue humano e micélio em transição para leveduras. As ESTs diferenciais serão obtidas através de subtração dos cDNAs (RDA). Através da comparação de dados obtidos nas diferentes condições experimentais, pretendemos identificar séries de genes especificamente expressos nos modelos utilizados. Utilizando-se abordagens bioquímicas serão analisados o papel de proteínas recombinantes nos estágios inciais do processo infectivo, avaliando sua ação como adesinas in vitro. Em síntese, utilizando-se uma combinação de abordagens experimentais e de Bioinformática e análises de ESTs geradas em condições de interação
patógeno-hospedeiro, será possível obter-se padrões de expressão gênica do fungo em resposta a modelos que mimetizem a infecção humana. Utilizando-se abordagens bioquímicas inciaremos a descrição do papel funcional de proteínas recombinantes nos estágios iniciais do processo infectivo. Moléculas recombinantes serão testadas quanto ao seu potencial de utilização na indústria farmaceutica..
Situação: Em andamento; Natureza: Pesquisa.
Alunos envolvidos: Graduação: (3) / Especialização: (0) / Mestrado acadêmico: (2) / Mestrado profissional: (0) / Doutorado: (5) .
Integrantes: Célia Maria de Almeida Soares - Coordenador / MARIA SUELI SOARES FELIPE - Integrante / ROSÁLIA SANTOS AMORIM JESUINO - Integrante / MARISTELA PEREIRA - Integrante / Alexandre Melo Bailào - Integrante / Sabrina Fonseca Ingenito Moreira - Integrante / Fabrícia Paula de Faria - Integrante.
Expressão de Genes de Paracoccidioides brasiliensis na Presença de Sangue e na Infecção Experimental de Melanócitos Humanos
Descrição: Expressão de Genes na presença de sangue.
Situação: Em andamento; Natureza: Pesquisa.
Alunos envolvidos: Graduação: (0) / Especialização: (0) / Mestrado acadêmico: (0) / Mestrado profissional: (0) / Doutorado: (0) .
Integrantes: Célia Maria de Almeida Soares - Coordenador.
Proteases de Paracoccidioides brasiliensis
Descrição: O projeto tem o objetivo de caracterizar as proteases de Paracoccidioides brasiliensis, utilizando-se informações obtidas nos bancos de ESTs geradas durante o transcriptoma de P. brasiliensis no processo infectivo. Análises funcionais das moléculas serão realizadas..
Situação: Em andamento; Natureza: Pesquisa.
Alunos envolvidos: Graduação: (1) / Especialização: (0) / Mestrado acadêmico: (0) / Mestrado profissional: (0) / Doutorado: (1) .
Integrantes: Célia Maria de Almeida Soares - Coordenador / MARISTELA PEREIRA - Integrante / Juliana Alves Parente - Integrante / Clayton Luiz Borges - Integrante / Fabrícia Paula de Faria - Integrante.
Expressão heteróloga da N-acetil- -D-glucosaminidase: Reatividade imunológica da proteína recombinante
Descrição: O fungo Paracoccidioides, agente etiológico da paracoccidioidomicose, apresenta as morfologias miceliana e leveduriforme. A transição de fases, evento determinante para o estabelecimento da infecção, está relacionada a rearranjos na constituição e arquitetura da parede celular do fungo. As formas miceliana e leveduriforme apresentam, por exemplo, teores distintos de quitina na constituição de suas paredes celulares.Enzimas hidrolíticas, classe nas quais se incluem as N-acetil-glucosaminidases (NAG), estão envolvidas na biossíntese e remodelação da parede celular em eventos morfogenéticos de fungos e são também antígenos em vários sistemas. Em função dessas considerações e ainda com base na concepção de que a parede celular forma uma interface entre o parasita e o hospedeiro, com implicação direta na patogênese, temos interesse na clonagem e caracterização do gene e cDNA codificantes para uma NAG de P. brasiliensis, massa molecular de 52 kDa, já purificada e parcialmente caracterizada em nosso laboratório. Com esses estudos pretendemos posteriormente explorar o papel da NAG como antígeno do fungo, bem como no metabolismo da parede celular..
Situação: Em andamento; Natureza: Pesquisa.
Alunos envolvidos: Graduação: (1) / Especialização: (0) / Mestrado acadêmico: (1) / Mestrado profissional: (0) / Doutorado: (1) .
Integrantes: Célia Maria de Almeida Soares - Coordenador.
Glucanosil transferases de Paracoccidioides brasiliensis
Descrição: O projeto tem o objetivo de caracterizar a família de glucanosiltransferases, potenciais fatores de virulência do fungo patogênico P. brasiliensis..
Situação: Em andamento; Natureza: Pesquisa.
Alunos envolvidos: Graduação: (2) / Especialização: (0) / Mestrado acadêmico: (1) / Mestrado profissional: (0) / Doutorado: (0) .
Integrantes: Célia Maria de Almeida Soares - Coordenador.
Formamidase de Paracoccidioides brasiliensis: Clonagem do cDNA e expressão heteróloga da proteína; identificação da proteína no proteoma de P. brasiliensis
Descrição: O projeto tem como objetivo caracterizar sequencias de cDNA e genômica codificantes da formamidase de P. brasiliensis. Estudos de citolocalização serão realizados..
Situação: Em andamento; Natureza: Pesquisa.
Alunos envolvidos: Graduação: (0) / Especialização: (0) / Mestrado acadêmico: (1) / Mestrado profissional: (0) / Doutorado: (0) .
Integrantes: Célia Maria de Almeida Soares - Integrante / MARIA SUELI SOARES FELIPE - Integrante / MARISTELA PEREIRA - Integrante / RENATA DE BASTOS ASCENÇO SOARES - Integrante / Clayton Luiz Borges - Coordenador / Nadya Silva Castro - Integrante.
Análise do Transcriptoma de Paracoccidioides brasiliensis no processo infectivo
Descrição: O projeto tem como objetivo caracterizar o transcriptoma de Paracoccidioides brasiliensis no processo infectivo. Ferramentas genéticas clássicas como transformação do fungo mediada por DNA e modelação da expressao de genes não foram ainda consistentemente estabelecidas para P. brasiliensis. A abordagem de identificação de ESTs para avaliação da expressao gênica durante a infecção representa uma alternativa eficiente para identificação de genes envolvidos na virulencia e patogenicidade.
Uma abordagem para a rápida identificação de um grande número de genes desconhecidos é o sequenciamento parcial de genes transcritos, conhecido como Expressed Sequence Tags (ESTs). Essa abordagem é muito rápida e um meio efetivo de identificação e caracterização de genes expressos em uma variedade de organismos e tem se tornado um método padrão para a identificação de genes tecido específicos e regulados de forma ligada ao desenvolvimento em organismos eucariotos inferiores e superiores (Strong& Nelson, 2000; Ajoka, 1998).
O esforço para o sequenciamento de ESTS de P. brasiliensis , forma leveduriforme, oriundas de granulomas de animais experimentais, permitirá comparação com o banco de ESTs oriundas de células leveduriformes mantidas em cultivo in vitro por longos períodos de tempo (Projeto Genoma Centro Oeste; Felipe et al, 2002). Esses estudos comparativos deverão prover informações relevantes para a patogênese, virulência e mecanismos envolvidos durante a interação patógeno hospedeiro..
Situação: Em andamento; Natureza: Pesquisa.
Alunos envolvidos: Graduação: (2) / Especialização: (0) / Mestrado acadêmico: (1) / Mestrado profissional: (0) / Doutorado: (2) .
Integrantes: Célia Maria de Almeida Soares - Coordenador / MARIA SUELI SOARES FELIPE - Integrante / ROSÁLIA SANTOS AMORIM JESUINO - Integrante / MARISTELA PEREIRA - Integrante / EUGÊNIA EMÍLIA WALQUÍRIA INÊS MOLLINARI MADLUN - Integrante / Juliana Alves Parente - Integrante / Clayton Luiz Borges - Integrante / Edmar Vaz de Andrade - Integrante / Nadya Silva Castro - Integrante / Milce Costa - Integrante / Marcelo M Brigido - Integrante / Wellingotn Santos Martins - Integrante.
Financiador(es): Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico - Auxílio
financeiro.
Caracterização de proteases de Paracoccidioides brasiliensis.
Descrição: O projeto tem o objetivo de caracterizar, promover a expressão heteróloga e identificar no proteoma e em células de P. brasiliensis proteases, potenciais fatores de virulência..
Situação: Em andamento; Natureza: Pesquisa.
Alunos envolvidos: Graduação: (1) / Especialização: (0) / Mestrado acadêmico: (0) / Mestrado profissional: (0) / Doutorado: (1) .
Integrantes: Célia Maria de Almeida Soares - Coordenador.
Coordenadora da Rede Nacional de Proteoma do estado de Goiás
Descrição: A Rede Proteoma tem o objetivo de formar pesquisadores e técnicos na área de análises de proteínas no Estado de Goiás, com integração com a Rede Nacional Proteoma..
Situação: Em andamento; Natureza: Pesquisa.
Alunos envolvidos: Graduação: (5) / Especialização: (0) / Mestrado acadêmico: (2) / Mestrado profissional: (0) / Doutorado: (1) .
Integrantes: Célia Maria de Almeida Soares - Coordenador / ROSÁLIA SANTOS AMORIM JESUINO - Integrante / MARISTELA PEREIRA - Integrante / Alexandre Melo Bailão - Integrante / Fabrícia Paula de Faria - Integrante.
CARACTERIZAÇÃO DE ANTÍGENOS RECOMBINANTES VISANDO O DIAGNÓSTICO DA PARACOCCIDIOIDOMICOSE (PCM): ANÁLISE DA EXPRESSÃO DE TRANSCRITOS NA INFECÇÃO, CITOLOCALIZAÇÃO E ANÁLISE FUNCIONAL DAS MOLÉCULAS RECOMBINANTES.
Descrição: Paracoccidioides brasiliensis é um patógeno fúngico respiratório, o qual é responsável pela Paracoccidioidomicose (PCM), a micose sistêmica de maior prevalência na América Latina. No Brasil são descritos 80% dos casos da micose. P. brasiliensis que transita entre as fases miceliana e leveduriforme durante a infecção não é um participante passivo no processo e a resposta do hospedeiro, induzida por antígenos do fungo, desempenha papel fundamental no estabelecimento da doença. O diagnóstico da PCM é feito por visualização direta do fungo in situ e ou isolamento e cultura do microrganismo, a partir de material obtido de pacientes, metodologias que requerem longo tempo e apresentam falta de sensibilidade. Os métodos imunológicos de diagnóstico, mais sensíveis, carecem de falta de padronização de antígenos, o que poderia ser solucionado pela produção de moléculas antigênicas recombinantes. O presente projeto tem o objetivo de avaliar a utilização das moléculas recombinantes de P. brasiliensis Catalase, Gliceraldeído-3-P-desidrogenase, Triose Fosfato Isomerase, Frutose Bifosfato Aldolase, Formamidase e HSP70 mitocondrial como antígenos para o diagnóstico da PCM. Ao mesmo tempo, o projeto utilizará a técnica de IVIAT (In Vitro Induced Antigen Techonology) para a caracterização de novos cDNAs codificantes de antígenos de P. brasiliensis , presumivelmente expressos in vivo, o que deverá ser confirmado em experimentos com RNAs extraídos do fungo, após infecção de fibroblastos em cultura. Com as estratégias propostas pretendemos obter novas moléculas úteis para o diagnóstico da PCM, bem como caracterizar cDNAs e as proteínas cognatas codificantes de antígenos expressos pelo fungo durante o processo infectivo. Os resultados combinados deverão gerar uma sub-série de genes que poderão auxiliar na definição de aspectos de virulência e patogenicidade de P. brasiliensis..
Situação: Em andamento; Natureza: Pesquisa.
Alunos envolvidos: Graduação: (0) / Especialização: (0) / Mestrado acadêmico: (0) / Mestrado profissional: (0) / Doutorado: (0) .
Integrantes: Célia Maria de Almeida Soares - Coordenador.
Caracterização de duas frutose bifosfato aldolases de Paracoccidioides brasiliensis
Descrição: O projeto tem o objetivo de caracterizar, promover a expressão heteróloga e analisar a reatividade imunológica da Frutose Bi-Fosfato Aldolase..
Situação: Em andamento; Natureza: Pesquisa.
Alunos envolvidos: Graduação: (1) / Especialização: (0) / Mestrado acadêmico: (1) / Mestrado profissional: (0) / Doutorado: (0) .
Integrantes: Célia Maria de Almeida Soares - Coordenador.
Caracterização da Triose fosfato isomerase de Paracoccidioides brasiliensis
Descrição: O fungo Paracoccidioides brasiliensis é o agente etiológico da
Paracoccidioidomicose (PCM), uma micose sistêmica de alta prevalência no
Brasil. Este fungo apresenta dimorfismo térmico, crescendo a 25 ºC sob a
forma miceliana e a 37 ºC sob a forma de leveduras. Estudos de Western
Blotting mostram que antígenos do fungo são reconhecidos por anticorpos
presentes no soro de pacientes com PCM, entre eles uma proteína de 29
kDa que apresenta regiões de homologia com Triose Fosfato Isomerase
(TPI) de outros microorganismos. Em nosso laboratório foi caracterizada
uma seqüência parcial de 959 pb desta TPI de P. brasiliensis (GenBank
AY037936). O nosso trabalho tem como objetivo a utilização deste
fragmento como sonda homóloga para rastreamento em um banco de cDNA do
fungo, a caracterização total da sequência codificante para esta
proteína, e a posterior utilização da mesma em vetor de expressão para
análise de suas características antigênicas..
Situação: Em andamento; Natureza: Pesquisa.
Alunos envolvidos: Graduação: (1) / Especialização: (0) / Mestrado acadêmico: (2) / Mestrado profissional: (0) / Doutorado: (0) .
Integrantes: Célia Maria de Almeida Soares - Coordenador.
Análise do papel das proteínas HSP60 e HSP70 mitocondriais no processo infectivo por Paracoccidioides brasiliensis
Descrição: O projeto tem o objetivo de avaliar o papel das proteínas mitocondriais HSP60 E HSP70 na resposta imune celular na Paracoccidioidomicose (PCM).
Ensaios de localização celular das proteínas e do possível papel das mesmas na adesão do fungo P. brasiliensis à células está sendo avaliado..
Situação: Em andamento; Natureza: Pesquisa.
Alunos envolvidos: Graduação: (2) / Especialização: (0) / Mestrado acadêmico: (0) / Mestrado profissional: (0) / Doutorado: (2) .
Integrantes: Célia Maria de Almeida Soares - Coordenador / MARISTELA PEREIRA - Integrante / RENATA DE BASTOS ASCENÇO SOARES - Integrante / Daniela Araújo Cunha Passos - Integrante.
Número de produções C, T & A: 2
Clonagem, caracterização e expressão heteróloga do cDNA codificante da Malato desidrogenase de Paracoccidioides brasiliensis
Descrição: O projeto tem o objetivo de caracterizar, promover a expressão heteróloga e analisar a reatividade imunológica da Malato desidrogenase, um antígeno de P. brasiliensis..
Situação: Em andamento; Natureza: Pesquisa.
Alunos envolvidos: Graduação: (1) / Especialização: (0) / Mestrado acadêmico: (0) / Mestrado profissional: (0) / Doutorado: (1) .
Integrantes: Célia Maria de Almeida Soares - Coordenador.
Clonagem e caracterização do cDNA codificante da ClpA de Paracoccidioides brasiliensis
Descrição: O projeto tem o objetivo de caracterizar e analisar a expressão da ClpA de Paracoccidioides brasiliensis..
Situação: Em andamento; Natureza: Pesquisa.
Alunos envolvidos: Graduação: (1) / Especialização: (0) / Mestrado acadêmico: (1) / Mestrado profissional: (0) / Doutorado: (0) .
Integrantes: Célia Maria de Almeida Soares - Coordenador.
Expressão heteróloga da Gliceraldeido 3-fosfato-desidrogenase de Paracoccidioides brasiliensis
Descrição: O fungo Paracoccidioides brasiliensis provoca a micose humana sistêmica de maior prevalência na América Latina, com a maioria dos casos descritos no Brasil. O fungo apresenta dimorfismo térmico, sendo a conversão da forma miceliana (220C) para a leveduriforme (370C) a condição essencial para o estabelecimento da infecção no hospedeiro. Em estudos anteriores avaliamos o perfil antigênico de extratos celulares totais da forma parasitária do fungo e procedemos ao isolamento e seqüenciamento parcial de aminoácidos de proteínas reativas com soros de pacientes com paracoccidioidomicose. Isoformas da proteína de 36 kDa, pIs 6.8 e 7.0 foram caracterizadas como gliceraldeído-3P-desidrogenase (GAPDH) de P. brasiliensis. GAPDH são imunogênicos em vários microrganismos, conferindo proteção em modelos animais experimentais. Em função dessas observações, oligonucleotídeos foram desenhados com base nas seqüências obtidas de aminoácidos e um fragmento de 1.2 Kb do gene da GAPDH foi obtido (GenBank AF 396657). O fragmento genômico foi utilizado no rastreamento de uma biblioteca e obtenção do cDNA cognato (Pbgadpdh1). Nesse projeto estão sendo propostos a expressão heteróloga do cDNA codificante para a GAPDH1 do fungo, a análise da reatividade imunológica da proteína recombinante, bem como estudos visando à localização celular da proteína..
Situação: Em andamento; Natureza: Pesquisa.
Alunos envolvidos: Graduação: (1) / Especialização: (0) / Mestrado acadêmico: (1) / Mestrado profissional: (0) / Doutorado: (1) .
Integrantes: Célia Maria de Almeida Soares - Coordenador.
Investigação das estratégias utilizadas por Paracoccidioides brasiliensis para aquisição de ferro: produção de sideróforos, captação e fontes preferenciais de ferro.
Descrição: Paracoccidioides spp.,um complexo de quatro espécies filogenéticas, e aqui referido como Paracoccidioides brasiliensis é o agente causal da paracoccidioidomicose, uma micose sistêmica, geralmente de caráter crônico. A resposta de P. brasiliensis a estresses ambientais é de grande interesse, dado a relevância dessa resposta a mecanismos de virulência em vários fungos patogênicos. Fatores estressantes como a privação de ferro são aspectos proeminentes da resposta imune do hospedeiro e baixos níveis desses compostos são associados à expressão de fatores de virulência em microrganismos. Estudos transcricionais realizados em nosso laboratório em condições de interação P. brasiliensis-hospedeiro sugerem fortemente um grande requerimento de ferro no processo infeccioso. Para investigar o metabolismo e homeostase de ferro em P. brasiliensis estão sendo propostas análises bioquímicas, genômicas e proteômicas. Nossos objetivos são: (i) caracterizar a resposta adaptativa global de P. brasiliensis a condições de deficiência de ferro através de análises transcricionais; (ii) caracterizar a via não redutiva de captação de ferro, através da produção e secreção de sideróforos; (iii) caracterizar as fontes preferenciais de ferro e as moléculas do fungo envolvidas na captação das fontes; (iv) caracterizar a via redutiva de captação de ferro em P.brasiliensis; (v) obter transformantes para genes das vias citadas..
Situação: Em andamento; Natureza: Pesquisa.
Alunos envolvidos: Graduação: (4) / Mestrado acadêmico: (2) / Doutorado: (6) .
Integrantes: Célia Maria de Almeida Soares - Coordenador / MARISTELA PEREIRA - Integrante / GEORGE S DEEPE JR - Integrante / Silvia Maria Salem Izacc - Integrante / Alexandre Melo Bailão - Integrante / Maria José Soares Mendes Giannini - Integrante / Clayton Luiz Borges - Integrante / Juliana Alves Parente - Integrante / Wellington Santos Martins - Integrante / Juan G McEwen - Integrante / Alan George Smulian - Integrante / Michael S. Winters - Integrante / Tristan Brandhorst - Integrante / Ana Flavia Alves Parente - Integrante / Orville Hernandez - Integrante / Gregory M. Gauthier - Integrante.
Financiador(es): Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico - Outra.